Заморозка дрожжей

Доброго времени суток, друзья.

Пришли из Штатов дрожжи Wyeast (5 пакетов) и есть желание их заморозить для длительного хранения. Морозить планирую в шприцах с глицерином. Есть несколько вопросов:

1) Какой концентрации должен быть глицерин (в наличии пищевой глицерин, 99,5%)?
2) Стоит ли сначала сделать стартер или после активации пакета, иглой забирать дрожжи прямо из пакета?

 

Мой глицерин сейчас имеет твёрдую форму Видимо в аптеке концентрация гораздо ниже.

 

Хм, вот оно оказывается что...

Для того, чтобы видеть ссылки, Вам необходимо зарегистрироваться или войти на форум под своим именем.

Теперь остался вопрос, какая концентрация безопасна для дрожжей? Или глицерин безопасен для дрожжей в принципе?

 

Литра сусла хватит на оживление? Стоит ли разбавлять глицерин?

 

Относительно "немного". Я так понимаю, что концентрация глицерина в шприце должна быть около 60%, грубо говоря 60% заполняем глицерином, оставшиеся 40% дрожжевой суспензией. При такой концентрации содержимое шприца будет наиболее стабильным (мой морозильник даёт -21С), исходя из таблички которую я выложил выше. Или я неправ?

Плюс где-то прочитал о добавлении аскорбиновой кислоты. В какой момент её добавлять?

 

Вобщем понял, кол-во глицерина подбираю по планируемой температуре хранения.
Прочитал в книге Yeast_ The Practical Guide to B - Jamil Zainasheff. Там написано:

Procedure for 20ºC storage
1. Follow steps 1 through 5 from the -80ºC procedure. (note: see below)
2. Prepare a solution of 50 percent glycerol and 50 percent YPD.
3. Add 1 gram per liter ascorbic acid to your solution.
4. Add 1 milliliter of the solution to the tube, and gently re-suspend the yeast with a sterile pipette.
5. Seal tightly, wrap in Parafilm, place the tubes upright inside a small Styrofoam ice chest and then place the ice chest into the freezer.
6. To revive the yeast, either select a portion of the culture with a pipette tip and plate it or warm the entire culture by holding in your gloved hand until it reaches room temperature, then add it to 100 milliliters of liquid growth medium.

А в интернетах пишут, что аскорбинка мощный антиоксидант и защищает мембрану дрожжей.

 

Мужчина, вы так просто убьете дрожжи, сделайте высевы на скосы и храните сколько хотите, перезасевая раз в пол года, год!
Любой криопротектор расчитывается на определенную температуру и в основном под жидкий азот, кроме того, нельзя просто так взять и смешать, надо удалить все фракции и воду, для этого применяется центрифуга, если этого не сделать, то 80% культуры будет потеряно сразу! Поверьте моему опыту

 

Нацелился я за заморозку Да и пробирок в таком количестве нет. Плюс тема на форуме не раскрыта. Нужно восполнять Вашим опытом и мануалом рано или поздно воспользуюсь. Но сейчас только хардкор

По поводу воды. Глицерин водорастворим, и его различные концентрации замерзают при разных температурах. Т.е. отделять воду не нужно.

 

Не совсем, глицерин уже раствор, те до требуемой концентрации нужно отжимать(и не только, для замораживания требуется чистая культура плюс криопротектор. Мало того его нужно стерилизовать, сделать это можно только в сухожарном шкафу, в противном случае получим тот же раствор только в еще меньшей концентрации.
А вообще, каждый удовлетворяет свои потребности в соответствии со своими предпочтениями . Те даже отговаривать не буду.
Но скажу следующее, что на агар я перешел, после опытов с замораживанием.

На следующей неделе...

 

У меня глицерин 99,5%. Честно говоря, был очень удивлён, когда забирал заказ на складе и дали банку с твёрдым веществом. Хотя по ощущениям, банка была плюсовой температуры. За пару дней полностью дома оттаял

 

Брал

Для того, чтобы видеть ссылки, Вам необходимо зарегистрироваться или войти на форум под своим именем.

, 120 рублей за кг.

 

А как он храниться?

Это скорее всего Немецкий(Северный масляный завод)

 

Процесс вижу так:
1) В литр сусла выливаю дрожжи из пакета
2) Охлаждаю и сливаю отработанное сусло
3) Пару раз нагреваю до 100С глицерин
4) В ёмкость с глицерином вливаю дрожжи, перемешиваю и накрываю марлей, пропитанной йодным раствором
5) Через марлю набираю шприцы

Или нужно делать иначе?